P16 Anticuerpo monoclonal de ratón

El anticuerpo monoclonal de ratón, P16, está diseñado para la detección de la proteína inhibidora de la mitótica p16. Este anticuerpo es específico para la proteína p16, que se une a las quinasas dependientes de ciclina D tipo CDK4 y CDK6, inhibiendo su actividad y, por lo tanto, deteniendo el ciclo celular en la fase G1. Es útil para la identificación de tumores en la cabeza y el cuello, específicamente en carcinoma de células escamosas del cuello uterino.

Este producto se suministra en dos formatos:

• Mob575: Anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos.
• PDM575: Anticuerpo listo para usar con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Más – Sistema de Detección de dos pasos.

Formato: Este producto se suministra como un sobrenadante de cultivo de tejidos y contiene azida sódica como conservante.

Principios de los Procedimientos: La detección de antígeno por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos etapas que implica en primer lugar, la unión de un anticuerpo primario contra el antígeno de interés, y segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ, usando técnicas manuales o mediante el Sistema de tinción de Diagnostic BioSystems Automated Montage 360™.

Dilución del Anticuerpo Primario: Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems, han sido optimizados para utilizarlos con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado y no requieren dilución adicional. La dilución adicional puede resultar en la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar cualquier cambio.

Almacenamiento y Manipulación: Almacenar a 2-8°C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8°C. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas de las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben utilizarse con prontitud. Las porciones no utilizadas de preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día.

La presencia de precipitado o un olor inusual indica que el anticuerpo se deteriora y no se debe utilizar.

Recomendaciones Diagnostic BioSystems:

• Control Positivo: Carcinoma de células escamosas del cuello uterino.
• Dilución del Concentrado: 1:50 – 1:100.
• El Pretatamiento: EDTA Buffer pH 8.0.
• Tiempo de Incubación y Temperatura: 30 min @ RT.
• Sistema de Detección: Sistema de Detección de dos pasos PolyVue™ Plus – o Sistema de detección automática Montage PolyVue Plus™ para usar con el Sistema Montage 360 / HighLighter.
• Tipo de Tejido: FFPE.

Control de Calidad: Consulte las Normas de Calidad del CLSI para el Diseño e Implementación de ensayos de inmunohistoquímica; Pauta aprobada Segunda edición (E / LA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU. (www.clsi.org). 2011.

Localización Celular: Citoplasma y Nuclear.

Limitaciones del Procedimiento: La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica ambos métodos de detección histológicos e inmunológicos. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmuno-tinción también puede causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y la incrustación o de la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad de la peroxidasa endógena o actividad pseudoperoxidasa en los eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción no específica en función del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen superficie de la hepatitis B antígeno (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa de rábano (Omata et al, 1980). Una contra tinción y preparaciones inadecuadas pueden comprometer la interpretación de los resultados.

Características de Presentación: La dilución óptima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: la fijación, el método de recuperación de calor, los tiempos de incubación, y el espesor de sección de tejido y el kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos únicos, los tiempos y los títulos de listados de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los protocolos de hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador el determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden utilizarse para la interpretación de los resultados morfológicos en conjunción con otras pruebas de diagnóstico y los datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.

Referencias:

• Sherr CJ et al. D-type cyclins and their cyclin-dependent kinases: G1 phase integrators of the mitogenic response. Cold Spring Harb Symp Quant Biol 1994, 59:11-9.