Glicoforina A Anticuerpo monoclonal de Ratón

Glicoforina A es un anticuerpo monoclonal de ratón, identificado como JC159, de isotipo IgG1, Kappa, específico para la membrana fija de formol de una leucemia de células vellosas. Este producto está optimizado para su uso en diagnóstico in vitro, específicamente en técnicas de inmunohistoquímica cualitativa.

Especificaciones:

• Clona: JC159
• Especie: Ratón
• Isotipo: IgG1, Kappa
• Diluyente Primario: K004

La concentración de Ig específica del lote disponible a petición.

Formatos Disponibles: Mob066: 1 ml Anticuerpo concentrado para uso con Diagnóstic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos. Mob066-05: 0,5 ml Anticuerpo concentrado para uso con Diagnóstic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos. PDM124: 6 ml Anticuerpo listo para usar, para uso con Diagnóstic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos.

Uso Previsto: Para uso diagnóstico in vitro. Este producto está destinado para inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejidos, fijado con formalina, embebidos en parafina, normal y neoplásico para ser visto por microscopio de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de los estudios histológicos con los controles adecuados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizadas por una persona (s) calificada al evaluar e interpretar los resultados.

Resumen y Explicación: Reconoce una glicoproteína de 39kDa, identificada como glicoforina A (GPA). Esta presente en los glóbulos rojos (RBC) y en las células precursoras de los eritrocitos. Se ha demostrado que la glicoforina actúa como receptor del virus Sendai y del parvovirus B19. La glicoforina A (GPA) es una de las sialoglucoproteínas de su membrana. En el GPA se el portador de tres especificidades de los grupos sanguíneos M y N, mientras que S (s) y U llevan las especificidades S y U. GPA y GPB proporcionan a las células una gran parte de su carga negativa en la superficie que les proporciona una barrera a la fusión celular, minimizando así la agregación entre los glóbulos rojos en la circulación.

Formato: Este producto se suministra con un sobrenadante de cultivo de tejidos y contiene azida sódica como conservante.

Principios de los Procedimientos: La detección de antígeno por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos etapas que implica en primer lugar, la unión de un anticuerpo primario contra el antígeno de interés, y segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ, usando técnicas manuales o mediante el Sistema de tinción de Diagnóstic BioSystems Automated Montage 360 ™.

Inmunotinción del Anticuerpo Primario: Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems, han sido optimizados para utilizarlos con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems y no requieren dilución adicional. La dilución adicional puede resultar en la pérdida de sensibilidad. Los diluentes de trabajo pueden cambiar. Los anticuerpos concentrados de Diagnostic BioSystems, deben diluirse de acuerdo con las recomendaciones de tinción, cuando se utilizan con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado. El uso de cualquier otro diluyente puede reducir la intensidad de los sistemas y protocolos utilizados han sido validados por el usuario. Las diluciones de los anticuerpos deben ajustarse apropiadamente y verificarse de acuerdo con el sistema de detección utilizado.

Materiales Necesarios, pero No Suministrados: Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHQ, no se proporcionan. Reactivos de pretratamiento, sistemas de detección, reactivos de control y otros reactivos auxiliares, están disponibles en Diagnostic BioSystems. Por favor diríjase a la página web de Diagnostic BioSystems, www.dbiosys.com

Almacenamiento y Caducidad: Almacenar a 2-8 °C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8 °C. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas a las especificadas aquí, deben ser verificadas por el usuario. Los reactivos deben utilizarse pronto después de la dilución. Las diluciones de preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día de uso. La presencia de precipitado u olor inusual indica que el anticuerpo se ha deteriorado y no debe ser utilizar. Los controles positivos y negativos se deben ejecutar simultáneamente con todas las muestras de pacientes. Si observa una tinción inesperada que no puede explicarse por variación en los procedimientos de laboratorio y se sospecha un problema con el anticuerpo, póngase en contacto con Soporte Técnico de Diagnóstic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2 o techsupport@dbiosys.com.

Recogida y Preparación de Muestras: Los tejidos fijados en formalina al 10% son adecuados para uso antes de la inclusión en parafina usando un pretratamiento térmico (Kiernan, 1990; Shi et al., Hrapchak, 1980) para más detalles sobre la preparación de muestras. Se recomienda al usuario validar el uso de los productos con sus muestras de tejido y manipularlas de acuerdo con sus prácticas de laboratorio.

Precauciones: Este anticuerpo contiene menos del 0,1% de azida sódica. Las concentraciones de menos de 0,1% de azida sódica no son consideradas peligrosas. OSHA, 1910.1030, OSHA de Comunicación de Riesgos y la Directiva 91/155 / C E E, de la UE (ácido NaN3) sodio son de uso común en los laboratorios. Sin embargo, el sodio puede reaccionar con tuberías de plomo y de cobre para formar compuestos de azida metálicos explosivos. Tras la eliminación, lavar con grandes cantidades de agua para prevenir la acumulación de azidas en las cañerías. (Centro para el Control de Enfermedades, 1976; Instituto Nacional de Seguridad y Salud Ocupacional, 1976). Las muestras, antes y después de la fijación y todos los materiales expuestos a ellos, deben ser manejados como si fueran capaces de transmitir infecciones y desecharse con las precauciones adecuadas. Nunca pipetear reactivos con la boca y evitar el contacto con la piel y las membranas mucosas con los reactivos y muestras. Si los reactivos entran en contacto con zonas sensibles, lavar inmediatamente copiosas copiosas de agua. La contaminación microbiana de los reactivos puede resultar en un aumento de la tinción no específica. Las diluciones de incubación y temperaturas diferentes a las especificadas puede dar resultados erróneos. El usuario debe validar cualquier cambio. El MSDS está disponible bajo petición.

El tratamiento de los tejidos antes de la tinción conlleva la recuperación de antígeno recomendado usando el Sistema de recuperación de antígeno de Diagnóstic BioSystems, Montage Opus™. Permitir enfriar las laminillas durante 20 minutos antes de la tinción.

Procedimiento de Tinción: Consulte la siguiente tabla para obtener las condiciones recomendadas específicas para este anticuerpo. Consulte el sistema de detección de Diagnóstic BioSystems PolyVue™ Plus de dos pasos, o Sistema de Detección de Montage PolyVue Plus™ Auto para obtener orientación sobre los protocolos de tinción específicos u otros requisitos.

• Parámetro: Control positivo
• Recomendaciones Diagnóstic BioSystems: Amígdala, Placenta
• Parámetro: Dilución del concentrado
• Recomendaciones Diagnóstic BioSystems: 1:50 – 1:100
• Parámetro: El pretratamiento
• Recomendaciones Diagnóstic BioSystems: Citrato Buffer pH 6,0
• Parámetro: Tiempo de incubación y temperatura
• Recomendaciones Diagnóstic BioSystems: 30 min @ RT
• Parámetro: Sistema de Detección
• Recomendaciones Diagnóstic BioSystems: Sistema de Detección de dos pasos PolyVue™ Plus – o Sistema de detección automática Montage PolyVue Plus ™ para usar con el Sistema Montage 360 / HighLighter
• Parámetro: Tipo de tejido
• Recomendaciones Diagnóstic BioSystems: FFPE

Control de Calidad: Consulte las Normas de Calidad del CLSI para el Diseño e Implementación de ensayos de inmunohistoquímica; Pauta aprobada Segunda edición (E / LA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU. (www.clsi.org). 2011.

Solución de Problemas: Contacte con el soporte técnico de Diagnóstic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2, techsupport@dbiosys.com o con su Distribuidor local para informar coloración inusual.

Localización Celular: Membrana Celular

Limitaciones del Procedimiento: La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica ambos métodos de detección histológicos e inmunológicos. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmunotinción pueden pueden causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y la inclusión y la de la naturaleza del tejido puede influir en los resultados del IHQ. (Nadji y Morales, 1983). El grado de reactividad de la peroxidasa actividad pseudoperoxidasa en neutrófilos y la biotina endógena puede causar tinción no específica en algunos tejidos (True, 1990). El uso de tejido congelado puede resultar en la fijación de un bajo rendimiento de la inmunotinción. Los tejidos que contienen superficie de antígeno de hepatitis (HBsAg) pueden dar falsos resultados positivos con los sistemas de peroxidasa de rábano (Omata et al, 1980). Una correcta tinción y preparaciones inadecuadas pueden comprometer la interpretación de los resultados.

Características de Presentación: La dilución óptima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: la fijación, el método de recuperación de la célula, los tiempos de incubación, el espesor de la sección de tejido y el tipo de tejido utilizado. Debido a la sensibilidad y especificidad de los reactivos únicos, los tiempos y los títulos de listados de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los protocolos de hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnóstic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden utilizarse para la interpretación de los resultados morfológicos en conjunto con otras pruebas de diagnóstico y los datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.

References:

1. Andersson, L.C., et al. 1979. Glycophorin A as a cell surface marker of early erythroid differentiation in acute leukemia. Int. J. Cancer 23: 717-720.
2. Liszka, K., et al., 1983. Glycophorin A expression in malignant hematopoiesis. Am. J. Hematol. 15: 219-226.