Anticuerpo monoclonal de ratón Anti-Isocitrate Dehydrogenase 1 (IDH1)-R132H

Formatos disponibles: Mob580R y PDM580R
Documentación: DS-8003-A
Fecha efectiva: 11/20/2019

Inmunógeno: Péptido lineal conjugado con KLH correspondiente a la isocitrato Deshidrogenasa 1 (IDH1) humana
Clon: HMab-1
Especie: Ratón
Isotipo: IgG1
Diluente Primario de Anticuerpos: K004

Catálogo | Descripción
Mob580R | Anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos
PDM580R | Anticuerpo listo para usar con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos

Uso previsto: Para uso diagnóstico in vitro. Este producto está destinado para inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejidos, fijado con formalina, embebidos en parafina, normal y neoplásico para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de los estudios histológicos con los controles adecuados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizadas por una persona(s) calificada al evaluar e interpretar los resultados.

Resumen y explicación: El anticuerpo anti isocitrato deshidrogenasa 1 (IDH1) R132H se une a la proteína con mutación IDH1, pero no se une a la proteína IDH1 de tipo natural. Las mutaciones puntuales de IDH1 R132H se observan con frecuencia en los gliomas de grado II y III de la Organización Mundial de la Salud (OMS) y constituyen un paso temprano en su biogénesis. IDH1 R132H puede utilizarse como marcador de diagnóstico para ayudar a diferenciar estos gliomas infiltrantes de gliosis, y como marcador de pronóstico para el tumor de glioma maligno primario secundario. El anticuerpo IDH1 R132H muestra una fuerte tinción citoplasmática y una tinción nuclear más débil en las células tumorales con la mutación R132H. También se observa una tinción difusa en la matriz tumoral fibrilar.

Formato: Este producto se suministra como sobrenadante de cultivo de tejidos purificado y contiene azida sódica como conservante.

Principios de los procedimientos: La detección de antígeno por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos etapas que implica en primer lugar, la unión de un anticuerpo primario contra el antígeno de interés, y segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ, usando técnicas manuales o mediante el Sistema de tinción de Diagnostic BioSystems Automated Montage 360™.

Dilución del anticuerpo primario: Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems, han sido optimizados para utilizarlos con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado y no requieren dilución adicional. La dilución adicional puede resultar en la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar cualquier cambio.

Materiales necesarios, pero no suministrados: Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHQ, no se proporcionan. Reactivos de pretratamiento, sistemas de detección, reactivos de control y otros reactivos auxiliares, están disponibles en Diagnostic BioSystems. Por favor diríjase a la página web de Diagnostic BioSystems, www.dbiosys.com.

Almacenamiento y manipulación: Almacenar a 2-8 °C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8 °C. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas de las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben utilizarse con prontitud. Las porciones no utilizadas de preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día.

Recogida y preparación de muestras: Los tejidos fijados en formalina al 10% son adecuados para uso antes de la inclusión en parafina. Consultar las referencias (Kiernan, 1981; Sheehan y Hrapchak, 1980) para más detalles sobre la preparación de muestras.

Control de calidad: Consulte las Normas de Calidad del CLSI para el Diseño e Implementación de ensayos de inmunohistoquímica; Pauta aprobada Segunda edición (E / LA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU. (www.clsi.org). 2011.

Localización celular: Citoplasma y núcleo.

Limitaciones del procedimiento: La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica ambos métodos de detección histológicos e inmunológicos. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmuno-tinción también puede causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y la incrustación o de la naturaleza inherente de tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad de la peroxidasa endógena o actividad pseudoperoxidasa en los eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción no específica en función del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen superficie de la hepatitis B antígeno (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa de rábano (Omata et al, 1980). Una contra tinción y preparaciones inadecuadas pueden comprometer la interpretación de los resultados.

Características de presentación: La dilución optima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: la fijación, el método de recuperación de calor, los tiempos de incubación, y el espesor de sección de tejido y el kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos clínicos, los tiempos y los títulos de listados de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los protocolos de hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador el determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden utilizarse para la interpretación de los resultados morfológicos en conjunción con otras pruebas de diagnóstico y los datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.

Referencias:

1. Capper D, et al: Characterization of R132H mutation-specific IDH1 antibody binding in brain tumorsBarin Pathol 2010 Jan;20(1):245-254
2. Capper D, et al: Application of mutant IDH1 antibody to differentiate diffuse glioma form nonneoplastic central nervous system lesions and therapy-induced changes. Am J Surg Pathol 2010 Aug;34(8):1199-1204
3. Camelo-Piragua S, et al: Mutant IDH1-specific immunohistochemistry distinguishes diffuse astrocytoma form astrocytosis. Acta Neuropathol 2010 Apr;119(4):509-511

Este producto es una herramienta esencial en la identificación y estudio de mutaciones IDH1 R132H en gliomas, proporcionando una tinción específica que ayuda a diferenciar entre tejidos normales y tumorales. Es una adición crucial para cualquier laboratorio que realice estudios de inmunohistoquímica en muestras de tejido cerebral.