Anticuerpo monoclonal de ratón para la detección del factor de transcripción de tiroides TTF-1, disponible en los formatos Mob285, Mob285-05, PDM104 y PDM104-10MM.
Inmunógeno: A los ratones BALB/c se les inyectó una proteína recombinante que codifica el antígeno de rata recombinante.
Clon: 8G7G3/1
Especie: Ratón
Isotipo: IgG1, Kappa
Diluyente Primario de anticuerpos: K004
Formatos disponibles:
- Mob285: 1 ml Anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos.
- Mob285-05: 0,5 ml Anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos.
- PDM104: 6 ml Anticuerpo listo para usar con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Más – Sistema de detección de dos pasos.
- PDM104-10MM: Anticuerpo con código de barras de 10 ml listo para usar con Diagnostic BioSystems Montage PolyVue Plus™ Sistema de Auto Detección & Montage™ Sistema 360 / Highlighter.
Uso previsto:
Para uso diagnóstico in vitro. Este producto está destinado para inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejidos, fijado con formalina, embebidos en parafina, normal y neoplásico para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de los estudios histológicos con los controles adecuados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizados por una persona (s) calificada al evaluar e interpretar los resultados.
Resumen y explicación:
Este anticuerpo es específico de una proteína de 40 kDa, que se identifica como el factor de transcripción de la tiroides (TTF-1). El TTF-1 se expresa en las células epiteliales de la glándula tiroides y el pulmón. El TTF-1 tiñe el adenocarcinoma primario de pulmón y el carcinoma de células pequeñas, pero no tiñe el carcinoma de colon y de mama.
Formato:
Este producto se suministra como un sobrenadante de cultivo de tejidos y contiene azida sódica como conservante.
Principios de los procedimientos:
La detección de antígeno por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos etapas que implica en primer lugar, la unión de un anticuerpo primario contra el antígeno de interés, y segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ, usando técnicas manuales o mediante el Sistema de tinción de Diagnostic BioSystems Automated Montage 360™.
Dilución del anticuerpo primario:
Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems, han sido optimizados para utilizarlos con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado y no requieren dilución adicional. La dilución adicional puede resultar en la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar cualquier cambio.
Materiales necesarios, pero no suministrados:
Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHQ, no se proporcionan. Reactivos de pretratamiento, sistemas de detección, reactivos de control y otros reactivos auxiliares, están disponibles con Diagnostic BioSystems. Por favor dirigirse a la página web de Diagnostic BioSystems, www.dbiosys.com.
Almacenamiento y manipulación:
Almacenar a 2-8 °C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8 °C. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas de las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben utilizarse con prontitud. Las porciones no utilizadas de preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día.
Precauciones:
Este anticuerpo contiene menos de 0,1% de azida sódica. Las concentraciones de menos de 0,1% no son materiales peligrosos notificables según US 29 CFR 1910.1200, OSHA de Comunicación de Riesgos y la Directiva 91/155 / CE. El azida de sodio (NaN3) usado como un conservante es tóxico si se ingiere. El azida de sodio puede reaccionar con tuberías de plomo y cobre para formar ácidos metálicos altamente explosivas. Tras la eliminación, lavar con grandes cantidades de agua para evitar la acumulación de azida en las cañerías. (Centro para el Control de Enfermedades, 1976, Instituto Nacional de Seguridad y Salud Ocupacional, 1976). Las muestras, antes y después de la fijación y todos los materiales expuestos a ellos, deben ser manejados como si fueran capaces de transmitir infecciones y desecharse con las precauciones adecuadas. Nunca pipetear reactivos con la boca y evitar el contacto con la piel y las membranas mucosas con los reactivos y muestras. Si los reactivos o muestras entran en contacto con zonas sensibles, lavar con cantidades copiosas de agua. La contaminación microbiana de los reactivos puede resultar en un aumento de la tinción no específica. Los tiempos de incubación o temperaturas diferentes de los especificados puede dar resultados erróneos. El usuario debe validar cualquier cambio. El MSDS está disponible bajo petición.
El tratamiento de los tejidos antes de la tinción:
Colocar los portaobjetos en la solución de recuperación de antígeno recomendado usando el Sistema de recuperación de antígeno de Diagnostic BioSystems, Montage Opus™. Permitir enfriar las laminillas durante 20 minutos antes de la tinción.
Procedimiento de tinción:
Consulte la siguiente tabla para obtener las condiciones recomendadas específicamente para este anticuerpo. Consulte el sistema de detección de Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus de dos pasos, o Sistema de Detección de Montage PolyVue Plus™ Auto para obtener orientación sobre los protocolos de tinción específicos u otros requisitos.
| Parámetro | Recomendaciones Diagnostic BioSystems |
|---|---|
| Control positivo | Pulmón |
| Dilución del concentrado | 1:25 – 1:50 |
| El pretratamiento | EDTA Buffer pH 8,0 |
| Tiempo de incubación y temperatura | 30 min @ RT |
| Sistema de Detección | Sistema de Detección de dos pasos PolyVue™ Plus – o Sistema de detección automática Montage PolyVue Plus™ para usar con el Sistema Montage 360 / Highlighter |
| Tipo de tejido | FFPE |
Control de calidad:
Consulte las Normas de Calidad del CLSI para el Diseño e Implementación de ensayos de inmunohistoquímica; Pauta aprobada Segunda edición (E / LA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU. (www.clsi.org). 2011.
Localización celular:
Nuclear
Limitaciones del procedimiento:
La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica ambos métodos de detección histológicas e inmunológicas. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmuno-tinción también puede causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y la incrustación o de la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad de la peroxidasa endógena o actividad pseudoperoxidasa en los eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción no específica en función del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen superficie de la hepatitis B antígeno (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa de rábano (Omata et al, 1980). Una contra tinción y preparaciones inadecuadas pueden comprometer la interpretación de los resultados.
Características de presentación:
La dilución óptima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: la fijación, el método de recuperación de calor, los tiempos de incubación, y el espesor de sección de tejido y el kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos clínicos, los tiempos y los títulos de listados de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los protocolos de hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador el determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden utilizarse para la interpretación de los resultados morfológicos en conjunto con otras pruebas de diagnóstico y los datos clínicos pertinentes por un patólogo calificado.
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