Anticuerpo policlonal de conejo Beta-Catenin

Beta-Catenin El anticuerpo policlonal de conejo Beta-Catenin está diseñado para la detección de la catenina β humana. Un péptido sintético derivado del centro de la proteína de la catenina β se utiliza como inmunógeno para generar el anticuerpo. Este producto se suministra como una fracción de inmunoglobulina purificada de antisueros de conejo con beta catenina β humana que contiene azida sódica como conservante.

Uso previsto Este producto está destinado para diagnóstico in vitro. Se utiliza en la inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejidos fijados con formol, embebidos en parafina, normal y neoplásico para su observación por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe estar acompañada de los estudios histológicos con los controles adecuados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizadas por una persona calificada al evaluar e interpretar los resultados.

Resumen y explicación Las cateninas son proteínas citoplasmáticas estructuralmente relacionadas que han sido clasificadas como alfa (α), beta (β), y gamma (γ), estas proteínas pueden unirse a la citoesqueleto intracelular altamente conservada de la cadherina E. Juntos, los complejos de catenina/cadherina desempeñan un papel importante como mediadores de la adhesión celular. β-catenina se asocia con la porción citoplasmática de la E-cadherina, que es necesaria para la función de la E-cadherina como molécula de adhesión.

Formato Este producto se suministra como una inmunoglobulina purificada de antisueros de conejo contra la catenina β humana que contiene azida sódica como conservante.

Principios de los procedimientos La detección de antígeno por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos etapas que implica en primer lugar, la unión de un anticuerpo primario contra el antígeno de interés, y segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ, usando técnicas manuales o mediante el Sistema de tinción de Diagnostic BioSystems Automated Montage 360™.

Dilución del anticuerpo primario Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems, han sido optimizados para utilizarlos con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado y no requieren dilución adicional. La dilución adicional puede resultar en la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar cualquier cambio.

Almacenamiento y manipulación Almacenar a 2-8°C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8°C. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas de las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben utilizarse con prontitud. Las porciones no utilizadas de preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día. La presencia de precipitado o un olor inusual indica que el anticuerpo se deteriora y no se debe utilizar.

Precauciones Este anticuerpo contiene menos del 0.1% de azida sódica. Las concentraciones de menos de 0.1% no son materiales peligrosos notificables según US 29 CFR 1910.1200, OSHA de Comunicación de Riesgos y la Directiva 91/155 / CE. El azida de sodio (NaN3) usado como un conservante es tóxico si se ingiere. El azida de sodio puede reaccionar con tuberías de plomo y cobre para formar azidas metálicas altamente explosivas. Tras la eliminación, lavar con grandes cantidades de agua para evitar la acumulación de azidas en las cañerías (Centro para el Control de Enfermedades, 1976, Instituto Nacional de Seguridad y Salud Ocupacional, 1976). Las muestras, antes y después de la fijación y todos los materiales expuestos a ellos, deben ser manejados como si fueran capaces de transmitir infecciones y desecharse con las precauciones adecuadas. Nunca pipetear reactivos con la boca y evitar el contacto con la piel y las membranas mucosas con los reactivos y muestras. Si los reactivos o muestras entran en contacto con zonas sensibles, lavar con cantidades copiosas de agua. La contaminación microbiana de los reactivos puede resultar en un aumento de la tinción no específica. Los tiempos de incubación o temperaturas diferentes de los especificados puede dar resultados erróneos. El usuario debe validar cualquier cambio. El MSDS está disponible bajo petición.

Características de presentación La dilución optima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación especifica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: la fijación, el método de recuperación de calor, los tiempos de incubación, y el espesor de sección de tejido y el kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos únicos, los tiempos y los títulos de listados de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los protocolos de hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador el determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden utilizarse para la interpretación de los resultados morfológicos en conjunción con otras pruebas de diagnóstico y los datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.

Parámetro

• Control positivo: Carcinoma de mama, Intestino grueso
• Dilución del concentrado: 1:50 – 1:100
• El pretratamiento: EDTA Buffer pH 8.0
• Tiempo de incubación y temperatura: 30 min @ RT
• Sistema de Detección: Sistema de Detección de dos pasos PolyVue™ Plus – o Sistema de detección automática Montage PolyVue Plus™ para usar con el Sistema Montage 360
• Tipo de tejido: FFPE

Control de calidad

Consulte las Normas de Calidad del CLSI para el Diseño e Implementación de ensayos de inmunohistoquímica; Pauta aprobada Segunda edición (E / LA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU. (www.clsi.org). 2011.

Solución de problemas Contacto con el soporte técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2, techsupport@dbiosys.com o con su Distribuidor local para informar coloración inusual.

Localización celular Citoplasma y membrana celular

Referencias

• Koslov y col.; J Biol Chem 272 (4 3): 27301, 1997.
• Dabbs DJ y col. Alabama.; Am J Surg Path. 2007; 31: 427-437
• Hazan y col.; J Biol Chem 272 (51): 32448, 1997.
• Bracke ME, y col.; Cur Top Microbiol Immunol 1996; 213 (Pt1): 123-61
• Mastracci TL et al. Alabama.; Mod Path. 2 005; 18: 741-751.

Limitaciones del procedimiento La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica ambos métodos de detección histológicos e inmunológicos. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmuno-tinción también puede causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y la incrustación o de la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad de la peroxidasa endógena o actividad pseudoperoxidasa en los eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción no específica en función del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen superficie de la hepatitis B antígeno (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa de rábano (Omata et al., 1980). Una contra tinción y preparaciones inadecuadas pueden comprometer la interpretación de los resultados.