Inmunógeno: Los ratones BALB/C fueron inmunizados con las células de Gaucher.
Clon: PG-M1
Especie: Ratón
Isotipo: IgG3, kappa
Primaria Diluyente Anticuerpo: K004
Concentración y especificaciones del lote disponible bajo petición.
Catálogo # | Descripción
- Mob094: 1 ml de anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos.
- Mob094-05: 0.5 ml de anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos.
- PDM065: 6 ml de anticuerpo listo para usar con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos.
- PDM065-10MM: 10 ml de cobro de barros listo para usar para su uso con Diagnostic BioSystems Montage PolyVue Plus™ Sistema de Detección Automática y Montage™ Sistema 360.
Uso previsto
Para uso diagnóstico in vitro. Este producto está destinado a la inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejido normal y neoplásica fijada, incrustadas en parafina, para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de estudios histológicos con los controles adecuados. Los historiales clínicos de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizados por una(s) persona(s) cualificada(s) al evaluar e interpretar los resultados.
Resumen y Explicación
Este anticuerpo reconoce una glicoproteína de 110 kDa, expresada en macrófagos humanos y en macrófagos de médula ósea. Mancha macrófagos en una amplia variedad de tejidos humanos, incluidos los macrófagos alveolares, macrófagos de hígado y bazo, además de células de Kupffer y macrófagos en la pulpa roja del bazo, la lamina propia del intestino, en los alvéolos pulmonares y en el seno de la médula. Reacciona con precursores mieloides y granulocitos de sangre periférica. También reconoce a las células de Langerhans y células dendríticas en la dermis, además de células del mesotelio. Reacciona con fibroblastos en la sinovia reumatoide, pero no en los fibroblastos de piel. La tinción con PG-M1 es citoplasmática, aunque también se observan tinciones en el golgi y en la membrana en algunos casos. El anticuerpo PG-M1 difiere del EMB11 (CD68) debido a su no reactividad con los granulocitos y su bajo fondo en eosinófilos.
Formato
Este producto se suministra como un sobrenadante de cultivo de tejido y contiene azida sódica como conservante.
Principios de los Procedimientos
La detección de antígenos por inmunohistoquímica (IHC) es un proceso de dos pasos que implica primero, la unión de un anticuerpo primario al antígeno de interés, y en segundo lugar, la detección de anticuerpos enlazados por un cromógeno. El anticuerpo primario se puede utilizar en IHC utilizando técnicas manuales o utilizando Diagnostic BioSystems Automated Montage 360™ Staining System.
Dilución de Primary Anticuerpo
Los BioSystems de Diagnóstico listos para usar anticuerpos se han optimizado para su uso con el sistema de detección de BioSystems de diagnóstico recomendado y no requieren más dilución. Una dilución adicional puede provocar la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar dicho cambio. Los anticuerpos concentrados de Diagnostic BioSystems deben diluirse de acuerdo con el procedimiento de tinción cuando se utilizan con el sistema de detección Diagnostic BioSystems recomendado. El uso de cualquier método de detección que no sea los sistemas y protocolos recomendados requiere la validación por parte del usuario. Las diluciones de anticuerpos deben ajustarse y verificarse adecuadamente de acuerdo con el sistema de detección utilizado.
Materiales requeridos pero no proporcionados
Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHC no se proporcionan. Los reactivos de pretratamiento, los sistemas de detección, los reactivos de control y otros reactivos auxiliares están disponibles en Diagnostic BioSystems. Consulte el sitio web de Diagnostic BioSystems en www.dbiosys.com
Almacenamiento y manipulación
Conservar a 2-8oC. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8 oC. No utilice el producto después de la fecha de expiración impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas de las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben utilizarse con prontitud. Las soluciones de trabajo no deben ser almacenadas ni utilizadas después de un día de su preparación. La presencia de precipitado o olor unusual indica que el anticuerpo se está deteriorando y no debe utilizarse.
Los controles positivos y negativos deben ejecutarse simultáneamente con todas las muestras de pacientes. Si se observa una tinción inesperada que no puede explicarse por variaciones en los procedimientos de laboratorio y se sospecha un problema con el anticuerpo, contacte con el Soporte Técnico de Diagnostic BioSystems llamando al (925) 484-3350, extensión 2 o techsupport@dbiosys.com.
Colección y preparación de especimenes
Los tejidos fijados en formalina al 10% son adecuados para su uso antes de la incrustación de parafina. Consultar referencias (Kiernan, 1981; Sheehan & Hrapchak, 1980) para más detalles sobre la preparación de muestras.
Se aconseja al usuario validar el uso de los productos con sus muestras de tejido preparadas y manipuladas de acuerdo con sus prácticas de laboratorio.
Precauciones
Este anticuerpo contiene menos de 0,1% de azida sódica. Las concentraciones inferiores a 0,1% no son materiales peligrosos reportables según U.S. 29 CFR 1910.1200, OSHA Hazard Communication y CE Directive 91/155/EEC. El azida sódica (NaN3) utilizado como conservante es tóxico si se ingiere. El azida sódica puede reaccionar con tuberías de plomo y cobre para formar azidas metálicas altamente explosivas. Al desechar, enjuague con grandes volúmenes de agua para evitar la acumulación de azida en la plomería. (Centre for Occupational and Environmental Health, 1995; Instituto Nacional de Seguridad y Salud Ocupacional, 1976). Los especímenes, y todos después de la fijación y todos los materiales expuestos a ellos, deben ser manipulados como si fueran capaces de transmitir la infección y desecharse con las precauciones adecuadas. Nunca pipetee los reactivos por vía oral. Evite el contacto entre la piel y las membranas mucosas con reactivos y muestras. Si los reactivos o especímenes entran en contacto con áreas sensibles, lave con abundante agua. La contaminación microbiana de los reactivos puede dar lugar a un aumento de las manchas inespecíficas. Los tiempos de incubación y temperaturas distintas de las especificadas pueden dar resultados erróneos. El usuario debe validar dicho cambio. El MSDS está disponible bajo petición.
Tratamiento de los tejidos antes de la tinción
Coloque las diapositivas en la solución de recuperación de antígenos recomendada mediante Diagnóstico BioSystems Montage Opus™ Antigen Retrieval System. Deje que las diapositivas se enfríen durante 20 minutos antes de la tinción.
Procedimiento de tinción
Consulte la siguiente tabla para conocer las condiciones recomendadas específicamente para este anticuerpo. Consulte el sistema de detección automática de BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos o el Sistema de detección automática de montage PolyVue Plus™ para obtener instrucciones sobre protocolos de tinción específicos o requisitos.
Parámetro | Recomendaciones de Diagnóstico BioSystems
- Control positivo: Amígdalas
- Dilución concentrada: 1:10-1:40
- Pretratamiento: HistoZyme
- Tiempo de incubación y temperatura: 30 min a RT
- Sistema de detección: PolyVue™ Plus – Sistema de detección de dos pasos o Montage PolyVue Plus™ Sistema de Detección Automática para el Sistema Montage 360
- Tipo de tejido: FFPE
Control de calidad
Consulte las Normas de Calidad de CLSI para el Diseño e Implementación de Ensayos de Inmuno-histoquímica: Orientación aprobada-Segunda edición (I/LA28-A2) CLSI Wayne, PA USA (www.clsi.org), 2011.
Solución de problemas
Póngase en contacto con el soporte técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2, techsupport@dbiosys.com o su distribuidor local para información de manchas inusuales.
Localización celular
Membrana celular
Limitaciones del procedimiento
La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica métodos de detección histoquímicos e inmunológicos. El procesamiento y manejo de tejidos antes de la inmunotinción también pueden resultar en resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación e incrustación o la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nady y Morales, 1983). La actividad endógena de peroxidasa o la actividad pseudoperoxidasa en eritrocitos y biotina endógena pueden interferir en los resultados dependiendo del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen antígeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) pueden dar un falso positivo con sistemas de peroxidasa basada en placenta (Omata et al. 1980). La contramarcha y el montaje inadecuados pueden comprometer la interpretación de los resultados.
Características del rendimiento
La dilución óptima de anticuerpos y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: fijación, método de recuperación de calor, tiempos de incubación, espesor de sección de tejido y kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos clínicos, los tiempos de incubación recomendados y los títulos enumerados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y protocolos de la hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden ser utilizadas para la interpretación de hallazgos morfológicos junto con otras pruebas diagnósticas y datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.
Referencias
- Human Pathol 24: 355, 1993.
- Kaslerling et al. Sendero moderno 6: 463, 1993.
- Thiele et al. Virchows Archiv A. Pathol Anat 421: 33, 1992.
Formatos Disponibles
- Mob094: 1 ml de anticuerpo concentrado para uso con el sistema de detección automatizado Biosystems PolyVue™ Plus.
- Mob094-05: 0.5 ml de anticuerpo concentrado para uso con el sistema de detección automatizado Biosystems PolyVue™ Plus.
- PDM065: 6 ml de anticuerpo listo para usar en combinación con el sistema de detección de dos pasos Biosystems PolyVue™ Plus.
- PDM065-10MM: 10 ml de cobro de barros listo para usar para su uso con Diagnostic BioSystems Montage PolyVue Plus™ Sistema de Detección Automática y Montage™ Sistema 360.
Este anticuerpo no contiene más de 0.1% de azida sódica como conservante y debe almacenarse entre 2-8 °C. Evite la exposición a la luz directa y manipule con las precauciones adecuadas para evitar contaminación. En caso de problemas técnicos, consulte al soporte de Diagnostic BioSystems para asistencia.
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