HLA-DR (β chain of DP, DQ & DR) Anticuerpo Monoclonal de Ratón - Zebra Genetics Especialistas en Biotecnología y Equipos de Laboratorio.

HLA-DR (cadena β de DP, DQ y DR) Anticuerpo Monoclonal de Ratón Mob069R PDM082R PDM082R-HL

Esta hoja de datos es aplicable a todos los tamaños (volumen) del producto. El volumen real del producto se indica en el vial.

Documento #: DS-0451-H Fecha efectiva: 23/02/2023

Inmunógeno: Células de amígdalas Clon: CR3/43 Especie: Ratón Isotipo: IgG1, kappa Diluyente de Anticuerpo Primario: K004

La concentración específica de Ig del lote está disponible a petición.

Catálogo #:

Mob069R: Anticuerpo concentrado para uso con el Sistema de Detección de Dos Pasos PolyVue™ Plus de Diagnostic BioSystems.
PDM082R: Anticuerpo listo para usar con el Sistema de Detección de Dos Pasos PolyVue™ Plus de Diagnostic BioSystems.
PDM082R-HL: Anticuerpo listo para usar en viales etiquetados con RFID para uso en el Sistema de Tinción Highlighter.

Uso Previsto: Para uso de investigación únicamente.

Resumen y Explicación: Reacciona con un epítopo común de los antígenos de histocompatibilidad mayor (MHC) clase II humanos, HLA-DP, -DQ y -DR. Los antígenos de MHC Clase II humanos son glicoproteínas transmembrana compuestas por una cadena α (36kDa) y una cadena β (27kDa). Se expresan principalmente en células presentadoras de antígenos como linfocitos B, monocitos, macrófagos, y células epiteliales tímicas, y también están presentes en linfocitos T activados. Los genes de MHC clase II humanos están ubicados en la región HLA-D que codifica al menos seis genes de cadena α y diez genes de cadena β. Tres loci, DR, DQ y DP, codifican los principales productos expresados de la región clase II humana. Las moléculas de MHC clase II humana se unen a péptidos procesados intracelularmente y los presentan a las células T colaboradoras. Por lo tanto, tienen un papel crítico en la iniciación de la respuesta inmune. Se ha demostrado que algunas enfermedades autoinmunes están asociadas con ciertos alelos de clase II.

Formato: Este producto se suministra como sobrenadante de cultivo de tejidos y contiene menos del 0.1% de azida sódica como conservante.

Principios de los Procedimientos: La detección de antígenos por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos pasos que implica la unión de un anticuerpo primario al antígeno, seguida por la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede usarse en IHQ utilizando técnicas manuales o utilizando el Sistema de Tinción Automatizado Montage 360™ de Diagnostic BioSystems o el Sistema de Tinción Highlighter.

Dilución del Anticuerpo Primario: Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems han sido optimizados para su uso con el Sistema de Detección recomendado de Diagnostic BioSystems y no requieren dilución adicional. La dilución adicional puede resultar en la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar cualquier cambio. Los anticuerpos concentrados de Diagnostic BioSystems deben diluirse de acuerdo con el procedimiento de tinción cuando se usan con el sistema de detección recomendado de Diagnostic BioSystems. El uso de cualquier otro método de detección además de los sistemas y protocolos recomendados requiere validación por parte del usuario. Las diluciones de anticuerpos deben ajustarse y verificarse adecuadamente según el sistema de detección utilizado.

Materiales Necesarios pero No Proporcionados: Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHQ no se proporcionan. Los reactivos de pretratamiento, sistemas de detección, reactivos de control y otros reactivos auxiliares están disponibles en Diagnostic BioSystems. Por favor, consulte la página web de Diagnostic BioSystems en www.dbiosys.com.

Almacenamiento y Manipulación: Almacenar a 2-8°C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de vencimiento cuando se almacena a 2-8°C. No utilice el producto después de la fecha de vencimiento impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan bajo condiciones diferentes a las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben usarse con prontitud. Las porciones no utilizadas de la preparación de anticuerpos deben ser desechadas después de un día. La presencia de precipitado o un olor inusual indica que el anticuerpo se ha deteriorado y no debe utilizarse. Los controles positivos y negativos deben ejecutarse simultáneamente con todas las muestras de pacientes. Si se observa una tinción inesperada que no puede explicarse por variaciones en los procedimientos de laboratorio y se sospecha un problema con el anticuerpo, contacte al Soporte Técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2 o techsupport@dbiosys.com.

Recogida y Preparación de Muestras: Los tejidos fijados en formalina al 10% son adecuados para uso antes de la inclusión en parafina. Consulte las referencias (Kiernan, 1981; Sheehan y Hrapchak, 1980) para más detalles sobre la preparación de muestras. Se recomienda al usuario validar el uso de los productos con sus muestras de tejido preparadas y manipuladas de acuerdo con sus prácticas de laboratorio.

Precauciones: Este anticuerpo contiene menos del 0.1% de azida sódica. Las concentraciones menores del 0.1% no son materiales peligrosos notificables según U.S. 29 CFR 1910.1200, OSHA de Comunicación de Riesgos y la Directiva 91/155/CE. La azida sódica (NaN3) se utiliza como conservante en este reactivo. La azida sódica puede reaccionar con plomo y cobre en la plomería para formar azidas de metal altamente explosivas. Al desechar, enjuague con grandes volúmenes de agua para evitar la acumulación de azida en la plomería. (Centro para el Control de Enfermedades, 1976, Instituto Nacional de Seguridad y Salud Ocupacional, 1976). Los especímenes antes y después de la fijación y todos los materiales expuestos a ellos deben manejarse como si pudieran transmitir infecciones y desecharse con las precauciones adecuadas. Use ropa protectora adecuada y guantes. Evite el contacto con la piel y las membranas mucosas. Si los reactivos o especímenes entran en contacto con áreas sensibles, lavar con grandes cantidades de agua. La MSDS está disponible a petición.

Tratamiento de los Tejidos Antes de la Tinción: Coloque las láminas en la solución recomendada de recuperación de antígeno utilizando el Sistema de Recuperación de Antígenos Montage Opus™ de Diagnostic BioSystems si la tinción se realiza manualmente o con el Sistema de Detección Automático PolyVue Plus™ de Montage. Permita que las láminas se enfríen durante 20 minutos antes de la tinción.

Procedimiento de Tinción: Consulte la siguiente tabla para las condiciones recomendadas específicamente para este anticuerpo. Consulte el Sistema de Detección de Dos Pasos PolyVue™ Plus de Diagnostic BioSystems o el Sistema de Detección Automático PolyVue Plus™ de Montage o el kit de núcleo Highlighter para el Sistema de Tinción Highlighter para obtener orientación sobre protocolos de tinción específicos u otros requisitos.

Parámetro:

Control Positivo: Amígdala
Dilución del Concentrado: 1:25-1:100
Pretratamiento: Buffer EDTA pH 8.0 (Manual/Montage)
Pretratamiento para HL: Buffer Tris-EDTA pH 9.0 (EA1, K102-HL)
Tiempo y Temperatura de Incubación: 30 min @ RT
Sistema de Detección: PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de Dos Pasos o Sistema de Detección Automático PolyVue Plus™ para Sistema Montage 360 o kit de núcleo Highlighter para Sistema de Tinción Highlighter
Tipo de Tejido: FFPE

Control de Calidad: Consulte las Normas de Calidad de CLSI para el Diseño e Implementación de Ensayos de Inmunohistoquímica; Pauta aprobada Segunda edición (I/LA28-A2) CLSI Wayne, PA USA (www.clsi.org). 2011.

Solución de Problemas: Contacto con soporte técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2, techsupport@dbiosys.com o con su distribuidor local para informar tinción inusual.

Localización Celular: Membrana celular.

Limitaciones del Procedimiento: La inmunohistoquímica es una técnica compleja que involucra métodos de detección histológicos e inmunológicos. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmunotinción también pueden causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación e inclusión o la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad de peroxidasa endógena o actividad pseudoperoxidasa en eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción no específica dependiendo del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen antígeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) pueden causar un falso positivo con sistemas de peroxidasa de rábano picante (HRP) (Omata et al., 1980). La contracoloración y montaje inadecuados pueden comprometer la interpretación de los resultados.

Características de Desempeño: La dilución óptima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: la fijación, el método de recuperación de calor, los tiempos de incubación, y el espesor de sección de tejido y el kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos únicos, los tiempos y los títulos de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los protocolos de hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos de Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden utilizarse para la interpretación de los resultados morfológicos en conjunto con otras pruebas de diagnóstico y los datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.

Referencias: