Anticuerpo monoclonal de conejo CD10 (EP195)

Inmunógeno: Un fragmento recombinante que corresponde a los residuos de la proteína CD10 humana.
Clon: EP195
Especie: Conejo
Isotipo: IgG de Conejo
Diluyente Primario de anticuerpos: K004

Catálogo:

• RMAB037: Anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos.
• RMPD037: Anticuerpo listo para usar, para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos.

Para uso diagnóstico in vitro. Este producto está destinado para inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejidos, fijado con formalina, embebidos en parafina, normal y neoplásico para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de los estudios histológicos con los controles adecuados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizados por una persona (s) calificada al evaluar e interpretar los resultados.

El antígeno común de la leucemia linfoblástica aguda (CALLA/CD10) es una metalo-endopeptidasa transmembrana de tipo II de paso único que divide e inactiva una variedad de factores de crecimiento peptídico importantes para la transducción de señales, incluyendo las encefalinas, la bombesina y la sustancia P. CD10 se expresa en un número de células hematopoyéticas como células T y B inmaduras, células B de los centros germinales de los folículos linfoides y linfocitos. También reacciona con una variedad de células no hematopoyéticas, incluida las células epiteliales del tracto gastrointestinal y el túbulo renal. En el hígado, el canalículo biliar muestra una coloración del antígeno hacia el exterior. El CD10 se ha utilizado para la identificación y clasificación de ciertos tipos de linfoma maligno y leucemia. CD10 se expresa en un alto porcentaje de casos de leucemia linfoblástica aguda, linfoma folicular, linfoma Burkitt, algunos tumores hematopoyéticos y leucemias mieloides agudas, así como en crisis de esplenosis infoblástica. También se sabe que es un marcador de las células estromales del endometrio. Es útil para diferenciar el carcinoma stromal endometrial (SEE) del leiomioma celular (LUC) y del leiomiosarcoma uterino (LIU).

Formato: Este anticuerpo se purifica por afinidad y se diluye en una solución salina tamponada con fosfato (PBS) de 10 mM, con un pH de 7,5, que contiene un 1% de albúmina sérica bovina (BSA) y un 0,05% de azida sódica (NaN3) como conservante.

Principios de los procedimientos: La detección de antígeno por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos etapas que implica en primer lugar, la unión de un anticuerpo primario contra el antígeno de interés, y segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ, usando técnicas manuales o mediante el Sistema de tinción de Diagnostic BioSystems Automated Montage 360 ™.

Dilución del anticuerpo primario: Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems, han sido optimizados para utilizarlos con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado y no requieren dilución adicional. La dilución adicional puede resultar en la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar cualquier cambio.

Los anticuerpos concentrados de Diagnostic BioSystems, deben diluirse de acuerdo con el procedimiento de tinción, cuando se utilizan con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado. El uso de cualquiera de los métodos de detección distintos a los sistemas y protocolos recomendados requiere validación por el usuario. Las diluciones de anticuerpos deben ajustarse apropiadamente y verificarse de acuerdo con el sistema de detección utilizado.

Materiales necesarios, pero no suministrados: Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHQ, no se proporcionan. Reactivos de pretratamiento, sistemas de detección, reactivos de control y otros reactivos auxiliares, están disponibles con Diagnostic BioSystems. Por favor dirigirse a la página web de Diagnostic BioSystems, www.dbiosys.com.

Almacenamiento y manipulación: Almacenar a 2-8 ° C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8 ° C. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas de las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben utilizarse con prontitud. Las porciones no utilizadas de preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día.

La presencia de precipitado o un olor inusual indica que el anticuerpo se deteriora y no se debe utilizar.

Los controles positivos y negativos se deben ejecutar simultáneamente con todas las muestras de pacientes. Si se observa una tinción inesperada que no puede explicarse por las variaciones en los procedimientos de laboratorio y se sospecha un problema con el anticuerpo, póngase en contacto con Soporte Técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2 o techsupport@dbiosys.com.

Recogida y preparación de muestras: Los tejidos fijados en formalina al 10% son adecuados para uso antes de la inclusión en parafina. Consultar las referencias (Kiernan, 1981: Sheehan y Hrapchak, 1980) para más detalles sobre la preparación de muestras.

Se recomienda al usuario validar el uso de los productos con sus muestras de tejido preparado y manipularlas de acuerdo con sus prácticas de laboratorio.

Precauciones: Este anticuerpo contiene menos del 0,1% de azida sódica. Las concentraciones de menos de 0,1% no son materiales peligrosos notificables según US 29 CFR 1910.1200, OSHA de Comunicación de Riesgos y la Directiva 91/155 / CE. El azida de sodio (NaN3) usado como un conservante es tóxico si se ingiere. El azida de sodio puede reaccionar con tuberías de plomo y cobre para formar ácidos metálicos altamente explosivos. Tras la eliminación, lavar con grandes cantidades de agua para evitar la acumulación de azida en las cañerías. (Centro para el Control de Enfermedades, 1976, Instituto Nacional de Seguridad y Salud Ocupacional, 1976). Las muestras, antes y después de la fijación y todos los materiales expuestos a ellos, deben ser manejados como si fueran capaces de transmitir infecciones y desecharse con las precauciones adecuadas. Nunca pipetear reactivos con la boca y evitar el contacto con la piel y las membranas mucosas con los reactivos y muestras. Si los reactivos o muestras entran en contacto con zonas sensibles, lavar con cantidades copiosas de agua. La contaminación microbiana de los reactivos puede resultar en un aumento de la tinción no específica. Los tiempos de incubación o temperaturas diferentes de los especificados puede dar resultados erróneos. El usuario debe validar cualquier cambio. El MSDS está disponible bajo petición.

El tratamiento de los tejidos antes de la tinción: Colocar los portaobjetos en la solución de recuperación de antígeno recomendado usando el Sistema de recuperación de antígeno de Diagnostic BioSystems, Montage Opus™. Permitir enfriar las laminillas durante 20 minutos antes de la tinción.

Procedimiento de tinción: Consulte la siguiente tabla para obtener las condiciones recomendadas específicamente para este anticuerpo. Consulte el sistema de detección de Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus de dos pasos, o Sistema de Detección de Montage PolyVue Plus™ Auto para obtener orientación sobre los protocolos de tinción específicos u otros requisitos.

Parámetro:

• Control positivo: Amígdalas, carcinoma de células renales, linfoma folicular
• Dilución del concentrado: 1:50 – 1:100
• El pretratamiento: Citrato Buffer pH 6,0
• Tiempo de incubación y temperatura: 30 min @ RT
• Sistema de Detección: Sistema de Detección de dos pasos PolyVue™ Plus – o Sistema de detección automática Montage PolyVue Plus™ para usar con el Sistema Montage 360
• Tipo de tejido: FFPE

Control de calidad: Consulte las Normas de Calidad del CLSI para el Diseño e Implementación de ensayos de inmunohistoquímica; Pauta aprobada Segunda edición (E / LA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU. (www.clsi.org). 2011.

Localización celular: Citoplasma, membrana celular

Limitaciones del procedimiento: La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica ambos métodos de detección histológicos e inmunológicos. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmuno-tinción también puede causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y la incrustación de la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad de la peroxidasa endógena o actividad pseudoperoxidasa en los eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción no específica en función del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen superficie de la hepatitis B antígeno (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa de rábano (Omata et al, 1980). Una contra tinción y preparaciones inadecuadas pueden comprometer la interpretación de los resultados.